L'obiettivo dello studio sviluppato dalla Medina Foundation, Center for Excellence nella ricerca di medicinali innovativi nell'Andalusia, è valutare il potenziale inibitorio degli estratti fungine inclusi nelle formulazioni della linea di micosalud sulle principali isoforme del CYP450 (CYP3A4, CYP2D6 e CYP2C9).
Le conclusioni di questo studio hanno dimostrato una bassa possibilità di interazioni farmacologiche In vivo per inibizione del CYP450.
Valutazione Inibizione del CYP450 da parte di integratori alimentari di funghi
Introduzione
A causa in parte dell'aumento del consumo di prodotti a base di erbe su scala globale, un forte aumento del numero riportato di interazioni sia in vitro che in vivo di integratori alimentari con farmaci da prescrizione che sono metabolizzati dagli enzimi del citocromo P450 (CYP). Prodotti popolari come Ginseng, Saw Palmetto e St. John's Wort hanno demoniati l'inibizione in vitro o l'induzione dell'attività del CYP. Mentre i rapporti di interazioni in vivo non sono così numerosi prodotti naturali come l'aglio, il succo d'oro e il succo di pompelmo hanno mostrato il potenziale per influenzare l'attività del CYP in vivo. Poiché continua l'uso ampio di medicinali a base di erbe e alternative, una maggiore consapevolezza da parte della ricerca e le comunità mediche dovrebbe permettersi un uso più sicuro di questi prodotti in futuro.
Obiettivo
Lo scopo di questo studio era di valutare il potenziale di potenziario in vitro di 8 diversi preparati di funghi comunemente usati sulle principali isoforme del CYP450 (CYP3A4, CYP2D6 e CYP2C9). Questi prodotti: Coriolus versicolor, Ganoderma Lucidum, Lentinula Edodes, Leafy Tap, Agaricus blazei, Cordyces sinensis e Polyporeus ombellatus sono tutti registrati in Spagna come produzione di integratori alimentari dell'agenzia di medicina spagnola.
Metodi e materiali
Preparazione di estratti di erbe
I prodotti a base di erbe commerciali (pillole o capsule) sono stati stuccati in un mortaio, se necessario, e sciolti in acqua e DMSO 80/20 per l'estrazione. Il dosaggio giornaliero raccomandato di ciascuna preparazione di funghi è stato preso come base per tutte le estrazioni1 per ulteriori dettagli. Si prevede che le concentrazioni in vitro coprano la gamma di concentrazioni che si verificano nell'intestino tenue e nel sangue in vivo. Tutte le soluzioni di stock di funghi sono state mantenute a 4 ° C, evitando la luce.
Saggio enzimatico
I microsomi epatici umani (0,25 mg/mL) sono stati incubati in 96 piastre separate per 15 minuti. A 37 ° C in un tampone fosfato di potassio da 0,1 mM (pH 7,4) contenente ogni rispettivo testosterone subtratato a sonda a 50 μm per CYP3A4, destrometorfano a 10 μm per CYP2D6 e Diclofenac a 20 μM per CYP2C9) e Sistema NADPH-INGGRENT Glucosio-6-fosfato, 3,3 mM MGCL 2 e 0,4 ml di glucosio-6-fosfato deidrogenasi). Gli estratti di funghi sono stati sciolti in DMSO/Acqua (20/80) e sono stati aggiunti in volumi di 2 μL. L'inibitore del controllo positivo (ketoconazolo per CYP3A4, chinidina per CYP2D6 e Sulfafenazolo per CYP2C9) sono stati sciolti in DMSO/Acqua (20/80) e sono stati aggiunti in volumi di 2 μL. Tutte le incubazioni sono state eseguite in DMSO 0,2%. Il volume di incubazione totale era di 200 μl. La reazione è stata terminata mediante l'aggiunta di 90 μL di acetonitrile. La formazione di prodotti di relazioni specifiche (6-b-idrossi-testosterone, dextorphan e 4’-idrossi-declofenac) è stata monitorata mediante cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa come precedente descritto2.
Risultati
Riepilogo dei valori IC50 per integratori alimentari di funghi nelle principali ISFORM CYP450
Conclusioni
Come precedentemente dimostrato da un confronto grezzo della potenza di inibizione in vitro e dell'entità delle interazioni Drarug, in quasi tutti i casi, se l'inibitore di Potenty era ≤1 μm, è stata osservata un'interazione in vivo Drarug-Dist; Tuttavia, se l'inibitore di Potenty fosse ≥10 μm, c'è ancora una bassa possibilità che il Draug potrebbe causare un'interazione3. Pertanto, gli integratori dietetici di funghi assificati in questo lavoro presentano una bassa possibilità di mostrare interazioni farmacologiche in vivo mediante inibizione del CYP450.
Riferimenti
- Hellum, B. H.; Hu, Z.; Nilsen, O. G. L'induzione di CYP1A2, CYP2D6 e CYP3A4 da sei prodotti a base di erbe commerciali in epatociti umani primari coltivati Clin Basic Pharmacol 2007, 100: 23-30.
- Pérez, J.; Díaz, C.; Salado, I. G.; Pérez, D. i.; Peláez, F.; Genilloud, O.; Vicente, F. Valutazione dell'effetto della solubilità acquosa composta nei test di inibizione del citocromo P450 progressi nella bioscienza e nella biotecnologia 2013, 4: 12.
- Obach, R. S.; Walsky, R. L.; Venkatakrishnan, K.; Gaman, E. A.; Houston, J. B.; Tremaine, L. M. L'utilità dei dati di inibizione del citocromo P450 in vitro nella previsione delle interazioni farmaco-farmaco J Pharmacol Exp the 2006, 316: 336-348.